ELISA試劑盒介紹和操作步驟

　　ELISA中有三個必要的試劑：免疫吸附劑、結合物和酶的底物等

　　完整的ELISA試劑盒包含以下各組分：

　　1.已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑)

　　2.酶標記的抗原或抗體(結合物);

　　3.酶的底物;

　　4.陰性對照品和陽性對照品(定性測定中)，參考標準品和控制血清(定量測定中);

　　5.結合物及標本的稀釋液;

　　6.洗滌液

　　7.酶反應終止液。

　　ELISA試劑盒操作步驟：

　　1. 加標準品：在酶標包被板上設標準品孔，依次加入不同濃度的標準品50ul(建議每個濃度做2個平行孔)

　　2. 加樣：分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品40μl，然后再加樣品親和素10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

　　3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

　　4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。

　　5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

　　6. 加酶：除空白孔外每孔加入酶標試劑50μl。

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