細(xì)胞生物學(xué)試劑 細(xì)胞培養(yǎng) 胰蛋白酶溶液(1%)資料

　　細(xì)胞生物學(xué)試劑 細(xì)胞培養(yǎng) 胰蛋白酶溶液(1%)資料

　　規(guī)格：100ml

　　保存條件：-20℃

　　保質(zhì)期：1年

　　產(chǎn)品名稱：胰蛋白酶溶液(1%)

　　簡介：

　　胰蛋白酶(Trypsin)是由胰臟產(chǎn)生沒有活性的胰蛋白酶原分泌到小腸后，小腸內(nèi)的腸肽酶會活化該酶原，形成胰蛋白酶。胰蛋白酶的特點(diǎn)在于已經(jīng)活化的胰蛋白酶，能夠繼續(xù)活化更多胰蛋白酶原，這種過程即自動催化。胰蛋白酶在小腸工作，它會將蛋白質(zhì)水解為肽，進(jìn)而分解為氨基酸，其最適溫度約為 37℃。可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞的消化，或者一些組織的消化，通常室溫下 1min 左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細(xì)胞

　　組成：

　　產(chǎn)品名稱規(guī)格Storage

　　Trypsin solution(1%)100ml-20℃

　　說明書一份

　　自備材料：

　　1、 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液

　　2、 顯微鏡

　　3、 離心機(jī)

　　胰蛋白酶溶液 操作步驟(僅供參考)：

　　1、貼壁細(xì)胞的消化

　　①吸除培養(yǎng)液，用無菌PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。

　　②加入少量Trypsin solution，略蓋過細(xì)胞即可，不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。

　　③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來，此時(shí)吸除胰酶細(xì)胞消化液。加入含血清的細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

　　④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入Trypsin solution 重新消化。

　　⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落，直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。

　　2、組織的消化 不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。

　　3、改良Tyrode's Solution(無鈣)如果產(chǎn)生少許沉淀，可以加熱溶解或過濾后使用，產(chǎn)生大量沉淀應(yīng)棄用。

　　4、 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

　　注意事項(xiàng)：

　　1. 盡量減少反復(fù)凍融的次數(shù)，以免失效。

　　2. 在使用Trypsin solution 過程中，要特別注意避免消化液被細(xì)菌污染。

　　3. Trypsin solution 消化細(xì)胞時(shí)間不宜過長，否則細(xì)胞鋪板后生長狀況會較差。

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