羅氏LightCycler® 480專用96孔白色PCR板科研應(yīng)用詳解

　　羅氏LightCycler® 480專用96孔白色PCR板是專為羅氏LightCycler® 480 II實時熒光定量PCR系統(tǒng)設(shè)計和優(yōu)化的高性能耗材。其的“白色"設(shè)計和制造工藝，使其在qPCR實驗中具有的性能，廣泛應(yīng)用于多個科研領(lǐng)域。

　　一、 核心設(shè)計特點與優(yōu)勢

　　白色聚丙烯材質(zhì)：

　　高效光反射：白色孔壁能將激發(fā)光和發(fā)射光最大限度地向頂部探測器反射，顯著提高熒光信號采集效率，降低孔間交叉干擾(Crosstalk)。

　　均一性：確保了孔與孔之間的信號一致性，提高了數(shù)據(jù)的精確度和重復(fù)性，尤其適合進行絕對定量和高通量檢測。

　　熱傳導(dǎo)性：材質(zhì)與儀器熱槽的導(dǎo)熱性匹配，確保96個孔的溫度高度均一，升降溫速率快，保證了PCR擴增效率的一致性。

　　光學平整蓋膜：

　　專用的密封箔(封板膜)透光性佳，且能牢固密封，防止實驗過程中蒸發(fā)和污染，是保證數(shù)據(jù)準確性的關(guān)鍵。

　　系統(tǒng)兼容性：

　　與LightCycler® 480 II系統(tǒng)的機械臂、光學檢測系統(tǒng)和熱循環(huán)模塊無縫集成，實現(xiàn)自動化操作和優(yōu)性能。

　　二、 主要科研應(yīng)用領(lǐng)域

　　基于其高靈敏度和高精確度的特點，該PCR板適用于所有對數(shù)據(jù)質(zhì)量要求嚴苛的qPCR應(yīng)用。

　　1. 基因表達分析

　　應(yīng)用描述：這是經(jīng)典的應(yīng)用。通過SYBR Green或TaqMan探針法，相對定量檢測不同樣本(如經(jīng)過藥物處理、不同疾病階段、不同組織部位)中特定mRNA的表達量差異。

　　為何適用：白色板的高靈敏度和低孔間干擾對于檢測低豐度表達基因和微小表達差異(如小于2倍的變化)至關(guān)重要，能有效降低假陰性和數(shù)據(jù)變異。

　　2. 病原體檢測與微生物定量

　　應(yīng)用描述：在醫(yī)學診斷、食品安全、環(huán)境監(jiān)測領(lǐng)域，定量檢測樣本中的病毒、細菌或真菌的載量。

　　為何適用：高靈敏度使其能夠檢測極低拷貝數(shù)的病原體核酸。精確的定量結(jié)果可用于評估感染嚴重程度、監(jiān)測治療效果和疫情監(jiān)控。

　　3. 基因分型與突變檢測

　　應(yīng)用描述：利用等位基因特異性探針對單核苷酸多態(tài)性(SNP)、插入缺失、點突變等進行分型。

　　為何適用：信號分辨能力可以清晰區(qū)分不同基因型(如野生型、雜合型、突變純合型)的熒光信號差異，保證分型結(jié)果的準確性和可靠性。

　　4. 高通量篩選

　　應(yīng)用描述：在藥物研發(fā)領(lǐng)域，用于篩選影響特定基因表達的化合物或siRNA。通常需要同時處理大量樣本。

　　為何適用：96孔格式是高通量篩選的標準平臺。其高度的孔間均一性確保了不同處理組之間數(shù)據(jù)的可比性，消除了因孔板位置不同帶來的系統(tǒng)誤差。

　　5. 下一代測序驗證

　　應(yīng)用描述：在完成全轉(zhuǎn)錄組或全基因組測序后，使用qPCR對關(guān)鍵的差異表達基因或候選變異進行驗證。

　　為何適用：qPCR是驗證NGS結(jié)果的“金標準"。該PCR板提供的高精度數(shù)據(jù)確保了驗證實驗的可信度。

　　6. microRNA分析

　　應(yīng)用描述：檢測微小的microRNA分子，其在基因調(diào)控中起著關(guān)鍵作用。

　　為何適用：microRNA通常長度短、豐度低，對檢測靈敏度要求高。白色板的信號增強效應(yīng)對此類應(yīng)用非常有幫助。

　　三、 使用注意事項

　　專用性：該板專為LightCycler® 480 II系統(tǒng)設(shè)計，不能用于其他品牌的qPCR儀(如ABI的QuantStudio系列)，因為板子的尺寸、厚度和光學特性不兼容。

　　密封：必須使用羅氏專用的光學封板膜，普通封板膜無法保證光學性能和密封性，可能導(dǎo)致蒸發(fā)和信號失真。

　　加樣：建議使用多通道移液器或自動化液體工作站進行加樣，以確保孔間體積一致，減少誤差。

　　質(zhì)量控制：對于極其精密的實驗，可使用ROX等被動參比染料校正孔與孔之間可能存在的微小熒光本底差異。

　　總結(jié)：

　　羅氏LightCycler® 480專用96孔白色PCR板并非一個普通的耗材，而是其qPCR系統(tǒng)的重要組成部分。它在需要高靈敏度、高精確度、高重復(fù)性以及優(yōu)異孔間一致性的各種qPCR科研應(yīng)用中發(fā)揮著不可替代的作用，是獲得可靠、可發(fā)表級別數(shù)據(jù)的堅實保障。

　　注：以上資料僅供參考，不作為實際數(shù)據(jù)，如需其他請咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。

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