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    如何正確進行ELISA試劑盒的洗滌步驟?

    更新時間:2025-09-08    點擊次數:517

      如何正確進行ELISA試劑盒的洗滌步驟?

      ELISA試劑盒洗滌步驟操作指南?

      一、洗滌次數與方式?

      常規洗滌次數?

      每次孵育(如抗原/抗體結合、酶標物反應)后需洗滌 ?3-5次?,以去除未結合物質并降低背景干擾?。

      若背景值高,可增加至5次洗滌;若信號弱,減少至3次?。

      洗滌方法?

      手工洗板?:

      每孔加入洗滌液(如PBST)至滿孔,靜置1-2分鐘,吸干后拍干?。

      避免用力過猛,防止抗原抗體復合物脫落?。

      洗板機洗板?:

      確保酶標板平整,避免洗液殘留?。


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      二、關鍵操作細節?

      洗滌液配置?

      使用新鮮配制的洗滌液(如1×PBST),避免放置過久產生絮狀物?。

      若洗滌液結晶,需37℃加熱溶解后稀釋?。

      溫度與時間控制?

      洗滌液溫度建議保持在20-30℃,避免低溫導致“花板"現象?。

      每次浸泡時間需≥1分鐘,確保充分洗滌?。

      拍干技巧?

      使用一次性吸水紙垂直拍干,避免交叉污染?。

      酶標板拍干后需立即進行下一步操作,防止干燥導致信號減弱?。

      三、常見問題與解決方案?

      “花板"現象?:

      可能原因:洗滌不凈、板不平整或孵育時間過長?。

      解決:增加洗滌次數、檢查板平整度、控制孵育時間?。

      高背景值?:

      可能原因:洗滌液失效或拍干不凈?。

      解決:更換新鮮洗滌液、需要拍干?。

      注:以上資料僅供參考,不作為實驗依據,具體產品說明請咨詢品牌供應商或技術老師。

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