有哪些常用的ELISA板包被方法？

    有哪些常用的ELISA板包被方法？

    ELISA板包被方法主要分為物理吸附和化學(xué)偶聯(lián)兩大類，具體選擇取決于目標分子（抗原/抗體）的特性‌。

    物理吸附（被動包被）

    原理‌：利用聚苯乙烯微孔板的疏水性，通過疏水相互作用和靜電吸附將蛋白質(zhì)固定在孔板表面‌。

    適用對象‌：大多數(shù)蛋白質(zhì)（如抗體、重組抗原、病毒蛋白等）‌。

    不適用對象‌：小分子（如半抗原、短肽<10個氨基酸），因其吸附能力弱‌。

    化學(xué)偶聯(lián)（主動包被）

    原理‌：通過化學(xué)交聯(lián)劑（如EDC/NHS）將蛋白質(zhì)的氨基（-NH?）或羧基（-COOH）與微孔板表面的活性基團共價結(jié)合‌。

    適用對象‌：小分子抗原（如藥物、激素、短肽）、多糖、脂類等不易吸附的分子‌。

    包被方法的選擇依據(jù)

    直接包被‌：將抗原或抗體直接通過物理吸附或化學(xué)連接固定在固相載體表面，操作簡單但可能因分子構(gòu)象變化影響活性。

    間接包被‌：如親和素-生物素化抗體模式，先包被鏈霉親和素，再通過生物素-親和素高親和力間接固定目標分子，穩(wěn)定性更好但步驟復(fù)雜。

    關(guān)鍵影響因素

    包被條件‌：緩沖液pH（常用pH9.6的碳酸鹽緩沖液）、溫度、時間及蛋白質(zhì)濃度需優(yōu)化‌。

    載體特性‌：聚苯乙烯微孔板的吸附性能、空白值及孔間均一性直接影響包被效果。

    注：以上僅供參考，不作為實際數(shù)據(jù)，實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術(shù)老師。Elisa試劑盒

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